Recombinant DT3C Protein
重组DT3C蛋白
目录号： FC501-01
单 价：￥2100
产品详情介绍
DT3C 是一种重组融合蛋白，由无受体结合域的白喉毒素片段（仅保留毒性结构域DT）与链球蛋白G的3C片段（负责结合IgG）共同构建而成。该蛋白能高亲和地结合抗体的Fc区域，当结合了抗体的DT3C随抗体一同被内吞进入细胞后，胞内的弗林蛋白酶会将其切割，释放出毒性DT。DT通过抑制EF2的ADP 核糖基化修饰，阻断细胞内的蛋白质合成，最终诱导细胞死亡。而未能进入细胞的游离DT3C则不具备杀伤能力。因此，根据细胞被杀伤的程度，即可判断抗体被细胞内化的效率。
本产品由大肠杆菌（Escherichia coli）表达，包含33-417aa (P00588) & 291-497aa (P19909)，N端含6×His标签，分子量69 kDa，纯度≥90% (SDS-PAGE)，浓度为1 mg/ml，内毒素＜1EU/μg。
使用重组DT3C蛋白的操作十分简便：只需将 DT3C 蛋白与目标抗体共同孵育 30 分钟，即可形成Ab-DT3C复合物。该复合物无需进一步处理，可直接加入含完全培养基的细胞中进行孵育。在体外实验中，其功能类似于抗体药物偶联物（ADC），能够通过内化作用将白喉毒素的细胞毒性效应靶向递送至特定细胞中，从而用于评估抗体的内化效率。
曲妥珠单抗细胞内化实验
以7000个/孔铺板SK-BR-3细胞，分别加入曲妥珠单抗(图中简称tras) 与TransGen、Company GM DT3C偶联物及单药对照，培养72 h后检测细胞活性(FC401)评估抗体内化效率。结果表明，TransGen-DT3C对细胞增殖均无影响，仅有偶联物组可杀伤细胞，且 TransGen -DT3C效果更优。
西妥昔单抗细胞内化实验
以5000个/孔铺板HCC827细胞，分别加入西妥昔单抗(图中简称cetu) 与TransGen、Company GM DT3C偶联物及单药对照，培养72 h后检测细胞活性(FC401)评估抗体内化效率。结果表明，TransGen-DT3C对细胞增殖均无影响，偶联物组可明显杀伤细胞，且 TransGen -DT3C效果更优。
稳定性好
西妥昔单抗细胞内化实验检测不同条件保存的TranseGen DT3C活性。结果表明，-80℃(正常保存)、 -20℃ 30 d、4℃ 14 d保存的 TransGen DT3C对细胞增殖抑制效果基本一致，稳定性好。
