从 RT 到 qPCR,加样全程可见

在 qPCR 实验操作中,加样环节的准确性直接影响最终数据的可靠性。96 孔板与 384 孔板加样密度高,体系多为无色透明,操作者难以仅凭肉眼判断是否已完成加样,漏加、重复加样或错加样的情况时有发生。而一旦出现异常扩增结果,排查加样失误所耗费的时间往往超过重新实验本身。针对这一长期困扰实验人员的操作痛点,全式金正式推出从反转录(RT)到荧光定量PCR(qPCR)全流程 4 款示踪系列新品,将可视化示踪技术从 qPCR 扩展至反转录环节,实现从 RT 到 qPCR 的全程示踪。


 

不止是 qPCR,RT也一样“看得见”

市面上已有一些示踪 qPCR 预混液, 但示踪型反转录试剂的选择非常有限,大多只有单一类型,难以覆盖不同实验场景。

这次全式金直接把 RT 试剂也做了示踪升级—AT342、AU342、AW312 分别添加了蓝色示踪染料,移液时肉眼可追踪。搭配 AQ641 使用,亮蓝色的 cDNA 模板和浅紫色的 qPCR SuperMix 混合变为深紫蓝色的体系,实现从 RT 到 qPCR 全程无缝示踪,做到真正的“全流程可视化”。


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示踪法 RT-PCR

三种示踪反转录试剂,覆盖不同实验场景

1     基础款 All-in-One SuperMix

TransScript 示踪版全预混第一链 cDNA 合成试剂盒(一步法去除 gDNA) (用于 qPCR) (AT342)

只需加入 gDNA Remover、模板 RNA 和水,cDNA 合成和去除基因组 DNA 同步完成,一步到位。优化的引物配比确保不同浓度 RNA 反转效率一致,短链 cDNA 合成效率高,15 分钟搞定。

2 热稳定型 5 分钟快速反转

示踪版耐高温全预混第一链 cDNA 合成试剂盒(一步法去除 gDNA) (用于 qPCR) (AU342)

反应温度 42-65℃,pg 级低模板量也能精准检出,时间紧迫时的最佳选择。

3 抗逆全能型

TransScript IV 示踪版一步法去除 gDNA 及第一链 cDNA 合成试剂盒 (AW312)

适用于降解 RNA,对残留抑制剂有良好抗性,合成长度可达 20 kb,反应温度 42-65℃,样本质量不高时靠它。


 

示踪法 qPCR

双色示踪 qPCR 预混液,让扩增也看得见

通用型示踪染料法荧光定量PCR预混液 (AQ641)



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看得见,照样准

加了染料,产品性能会不会打折?全式金把示踪版(AT342、AU342、AW312)和不带示踪(AT341、AU341、AW311)的原版做了全面对比——结论是:几乎没有差别!不仅如此,在更严苛的 qPCR 定量实验中,全式金示踪版(AQ641)与同类产品相比更为出色。


AT342 性能展示

不同基因反转录扩增



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使用 AT342 及与其对应的未加示踪染料版(AT341)对 100 ng 水稻 RNA 样本反转录后进行 qPCR 扩增(AQ641)。


 

反转录效率高

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使用 AT342 及与其对应的未加示踪染料版(AT341)对梯度稀释 (1000 ng-0.1 ng,10 倍梯度)的人 RNA 样本反转录后进行 qPCR 扩增(AQ641)。



 

适用物种范围广

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使用 AT342 及与其对应的未加示踪染料版(AT341)对不同物种的 RNA 模板反转录后进行 qPCR 扩增(AQ641)。


 

AU342 性能展示

不同基因反转录扩增

基因 1

基因 2

使用 AU342 及与其对应的未加示踪染料版(AU341)对 100 ng 水稻 RNA 样本反转录后进行 qPCR 扩增(AQ641)。

AU341

AU342

AU341

AU342


 

反转录效率高

基因 1

基因 2

AU341: E=91.7%

AU342: E=91.8%

AU341: E=94.7%

AU342: E=95.1%

使用 AU342 及与其对应的未加示踪染料版(AU341)对梯度稀释(1000 ng-0.1 ng,10 倍梯度)的人 RNA 样本反转录后进行 qPCR 扩增(AQ641)。

AU341

AU342

AU341

AU342


 

适用物种范围广

使用 AU342 及及与其对应的未加示踪染料版(AU341)对不同物种的 RNA 样本反转录后进行 qPCR 扩增(AQ641)。


 

高 GC 模板扩增

GC 含量 60%

GC 含量 65%

使用 AU342 及及与其对应的未加示踪染料版(AU341)对人高 GC 含量的 RNA 样本反转录后进行 qPCR 扩增(AQ641)。

AU341

AU342

AU341

AU342


 

AW312 性能展示

不同基因反转录扩增

基因 1

基因 2

使用 AW312 及与其对应的未加示踪染料版(AW311)对 100 ng 水稻 RNA 样本反转录后进行 Qpcr 扩增(AQ641)。

AW311

AW312

AW311

AW312


 

反转录效率高

基因 1

基因 2

AW311: E=97.5%

AW312: E=95.7%

AW311: E=103.6%

AW312: E=102.0%

使用 AW312 及与其对应的未加示踪染料版(AW311)对梯度稀释(1000 ng-0.1 ng,10 倍梯度)的人 RNA 样本反转录后进行 qPCR 扩增(AQ641)。

AW311

AW312

AW311

AW312


 

适用物种范围广

使用 AW312 及与其对应的未加示踪染料版(AW311)不同物种的 RNA 模板反转录后进行 qPCR 扩增(AQ641)。


 

AQ641 性能展示

扩增效率高,线性关系好

E=99.5%

R2=0.999

TransGen

E=98.2%

R2=0.990

Company V

E=95.3%

R2=0.990

Company T

使用 TransGen 及同类产品,以梯度稀释的携带人管家基因 GAPDH 的质粒 DNA(250 pg/μl -0.025 pg/μl ,10 倍稀释)为模板,进行扩增得到扩增曲线和标准曲线。


 

扩增曲线形态优

人 GC 含量 55%

水稻 GC 含量 49%

使用 TransGen 及同类产品,分别以人、水稻的 cDNA 为模板进行 qPCR 扩增。

TransGen

Company T

TransGen

Company T

Company V

Company V


 

高 GC 模板扩增

人 GC 含量 62%

水稻 GC 含量 68%

使用 TransGen 及同类产品对人、水稻的高 GC 含量的 cDNA 模板进行 qPCR 扩增。

Company T

Company T

TransGen

Company V

TransGen

Company V


 

兼容不同仪器

Bio-Rad CFX96

ABI 7500

ABI Step One Plus

QuantStudio 5

全式金 TSQ-4096

以人的 cDNA 为模板,在不同仪器上进行扩增得到的扩增曲线。


 

稳定性好

SuperMix 热加速稳定性

SuperMix 冻融稳定性

SuperMix 经 37℃ 保存 7 天及反复冻融 20 次后仍可稳定扩增。


 

10×Sample Buffer 热加速稳定性

Sample Buffer 经 37℃ 保存 7 天后仍可稳定扩增。


 

产品信息

 

  类别

产品名称

目录号

规格

示踪法 RT

TransScript®   Visual All-in-One First-Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (One-Step   gDNA Removal)

AT342

50/100/500   rxns

TransScript®   Uni Visual All-in-One First-Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (One-Step   gDNA Removal)

AU342

100   rxns

TransScript® IV Visual One-Step gDNA   Removal and cDNA Synthesis SuperMix

AW312

50/100   rxns

示踪法   qPCR

PerfectStart®   IV Visual Green qPCR SuperMix

AQ641

1/5×1/15×1/25×1   ml

 


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