产品详情介绍
来源:非洲绿猴
组织来源:肾
生长状态:贴壁
完全培养基:DMEM(Code#FI101)+10%FBS(Code#FS501)+Penicillin-Streptomycin(100×)(Code#FG101)
培养条件:37℃,95%洁净空气+5%二氧化碳
细胞复苏:
将细胞从液氮中取出,迅速置于37℃水浴锅中,并轻轻晃动。待冻存的细胞融化成只有绿豆大小的冰球时,迅速移至细胞工作台,将细胞移入15 ml离心管中,加入预热的完全培养基3-6 ml,轻轻混匀,500-800 rpm离心5-10 min,小心地移去上清。使用3-15 ml培养基重悬细胞,再轻轻的混匀细胞,接种至合适的新培养介质中。
细胞传代:
以6孔板为例,将细胞培养基移去,使用无钙镁PBS(Code#FG701)小心地清洗细胞1-3次,移掉PBS,加入0.5-1 ml 胰酶(Code#FG301),37℃培养箱孵育1-3 min,在倒置显微镜下观察,大部分细胞变圆且没有细胞或仅有少量细胞脱落时,使用3-6 ml完全培养基中止消化,轻轻的混匀细胞,传代至合适的新培养介质中。如果细胞状态较差,在中止消化后,500-800 rpm离心5-10 min,去除上清,使用合适量的培养基重悬细胞,再轻轻的混匀细胞,传代至合适的新培养介质中。
传代比例:1:3-1:6
传代间隔:每2-3天传代一次
冻存培养基:TransStem® Chemically Defined Xeno-free Cell Cryopreservation Medium-Protein Free(Code#MC102)
细胞冻存:
以6孔板为例,待细胞汇合度为90%左右、细胞数量为1-2×106个细胞时,移去细胞培养基,使用无钙镁PBS(Code#FG701)小心地清洗细胞1-3次,移掉PBS,加入0.5-1 ml 胰酶(Code#FG301),37℃培养箱孵育1-3 min,在倒置显微镜下观察,大部分细胞变圆且没有细胞或仅有少量细胞脱落时,使用3-6 ml完全培养基中止消化,轻轻的混匀细胞,500-800 rpm离心5-10 min,去除上清,使用1 ml冻存培养基轻轻的重悬细胞,将细胞移入冻存管中,标记并放入4℃预冷的冻存盒中,置于-80℃,冷冻过夜。次日取出放于液氮中长期保存。



